Search

Apa persiapan yang harus dilakukan pada spesimen sebelum diteliti menggunakan Mikroskop Elektron (EM) adalah

Prinsip Mikroskop Elektron Transmisi EM

Persiapan spesimen: Sel dikenakan langkah-langkah berikut untuk menyiapkan sampel yang sangat tipis (20 hingga 100 nm tebal)
  • Fiksasi: Sel difiksasi menggunakan glutaraldehid atau osmium tetroksida untuk stabilisasi.
  • Dehidrasi: Spesimen kemudian didehidrasi dengan pelarut organik (mis. Aseton atau etanol).
  • Embedding: Spesimen tertanam dalam polimer plastik dan kemudian, dikeraskan untuk membentuk blok padat. Sebagian besar polimer plastik tidak larut dalam air; maka dehidrasi lengkap spesimen harus dilakukan sebelum penanaman.
  • Mengiris: Spesimen kemudian dipotong menjadi irisan tipis dengan pisau ultramicrotome, dan irisan dipasang pada slide logam (tembaga).

Teknik pembekuan-beku: Ini adalah metode alternatif untuk persiapan spesimen untuk memvisualisasikan organel internal dalam sel. Sel-sel dibekukan dengan cepat lalu dihangatkan
  1. retak oleh pisau yang mengekspos organel internal → mengalami sublimasi
  2. dibayangi oleh lapisan dengan platinum dan karbon.

Langkah-langkah untuk meningkatkan kontras EM meliputi:

  1. Pewarnaan dengan larutan garam logam berat seperti timbal sitrat dan uranil asetat
  2. Pewarnaan negatif dengan logam berat seperti asam fosfotungstik atau uranil asetat.
  3. Pembayangan: Spesimen dilapisi dengan film tipis dari platinum atau logam berat lainnya pada sudut 45 ° sehingga logam tersebut menyerang mikroorganisme hanya pada satu sisi

Mikroskop elektron:

  1. > 100.000 pembesaran
  2. Resolusi 0,5 nm
  3. Sumber radiasi - Berkas elektron
  4. media vakum tinggi
  5. Spesimen dipasang pada kisi Logam
  6. Lensa elektromagnet